Issue d'une famille de quatre enfants dont elle est l'aînée, Jane Frances Kaczmarek est née le 21 Décembre 1955 à Milwaukee, dans le Wisconsin (Etats-Unis). En 1992, elle se marie avec Bradley Whitford, lui aussi acteur, et connu pour ses rôles dans les séries A la Maison Blanche et Studio 60, et qui a de son côté joué dans un épisode de Malcolm : "Pique-nique Fatal (2)".
En 1998, le couple a son premier enfant, Frances. L'année suivante, Jane accouche de son deuxième enfant, George Edward. Enfin, c'est en 2002 que le Mary Louisa vient au monde. Cette troisième grossesse est intervenue lors de la quatrième saison de Malcolm, c'est donc à cet événement qu'on doit la naissance de Jamie, le cinquième enfant de la famille dans la série. Au départ intéressée par une carrière de professeur de théâtre, elle finit par se diriger vers le milieu cinématographique. Après avoir passé sept ans dans la peau de Lois dans Malcolm, Jane Kaczmarek souhaite se consacrer à sa famille. C'est pour cela que l'actrice demande maintenant à travailler à mi-temps à la télévision, comme c'est le cas pour Raising the Bar, la série judiciaire qui marque son retour post-Malcolm.